冷凍大量蛋白產品可帶來很多好處，但并非沒有挑戰(zhàn)。凍融設備的操作參數、原液的存儲、冷凍狀態(tài)下的運輸都是需要考慮的關鍵因素。在設計工藝時，必須充分理解凍結和解凍現象，了解產品開發(fā)過程中的各種因素和約束條件，這對規(guī)模放大和工藝開發(fā)，以及為臨床和商業(yè)生產制定適當的控制策略至關重要。

本文重點介紹了與原液儲存相關的各種因素，例如DS儲存溫度的選擇，常用的DS儲存容器，以及與選擇有關的注意事項。

通常用于存儲生物制品DS的溫度范圍是2-8°C（適用于短期存儲）、-20、-30、-40，-55和-70°C。盡管對于某些類型的DS可以選擇在2–8°C下存儲，但生物制劑DS通常以原液在冷凍條件下存儲，因為它可以提供更長的存儲期限。DS為凍結條件下的大容量存儲提供了許多重要的好處，當前許多原液都會采用冷凍的方式保存。

為確保活性藥物的儲存穩(wěn)定性，必須將其儲存在制劑的玻璃態(tài)Tg'以下。因此，在設計冷凍溫度時，應考慮配方的Tg'，并選擇比Tg'值低5-10°C的冷凍溫度。這結合了非常高的熱負荷和非常低的熱驅動力。

用于存儲DS凍融系統(tǒng)和的容器分為兩類：

1.受控的凍融操作（也稱為主動系統(tǒng))

2.不受控制的凍融操作（也稱為被動系統(tǒng)，其中凍融速率取決于環(huán)境溫度和負載）。

受控的凍融系統(tǒng)可提供一致的凍融速率，可應用于預定容器中的蛋白質原料藥。

目前市面上冷凍容器的選擇主要有三種：

瓶子、袋子、不銹鋼容器。這三種容器各有優(yōu)劣。

由于現有供應商的不銹鋼容器價格都非常昂貴，我們在此就比較瓶子和袋子。

瓶子很堅固，價格也很便宜，在行業(yè)內使用時間長，大家都非常了解。但瓶子因為需要開口操作，在原液裝入和倒出的無菌方面需要更注意。國內CMO企業(yè)采用在隔離器進行分裝，無法勝任大量原液的分裝且操作繁瑣，在新項目中已經放棄這個分裝方式。另外在凍融過程中，因為冷凍時蓋子和瓶子膨脹收縮情況不一致，將會導致瓶蓋和瓶子分離的情況發(fā)生。

袋子是一次性系統(tǒng)的優(yōu)質選擇存儲設備，經過同行多年實踐，也得到了大量的溶出析數據。同時袋子的冷凍可以放大。整個系統(tǒng)是封閉的，特別方便使用。但有一個大的問題讓眾多研究者擔憂，袋子容易破損。這個問題在目前市場的關注度越來越高。 

一次性工藝是生物制藥生產的優(yōu)質選擇，瓶子由于分裝、凍融不利于放大，大多同行還是會優(yōu)先選擇一次性袋子。---來自CMO企業(yè)資深凍融專家的意見。

如何更好的讓原液在袋子中受控凍融，我們就需要深入了解冷凍過程中主要使蛋白變性的三個機制：

（1）低溫濃縮（2）冰面變性（3）冷變性

后期我們將圍繞如何降低蛋白變性的三個機制的方法展開說明，敬請期待～